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直接法是细胞因子ELISA试剂盒的一种检验方法

2019-05-10 浏览次数:1303

     细胞因子是免疫原、丝裂原或其他刺激剂诱导多种细胞产生的低分子量可溶性蛋白质,具有调节固有免疫和适应性免疫、血细胞生成、细胞生长以及损伤组织修复等多种功能。细胞因子可被分为白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子超家族、集落刺激因子、趋化因子、生长因子等。众多细胞因子在体内通过旁分泌、自分泌或内分泌等方式发挥作用,具有多效性、重叠性、拮抗性、协同性等多种生理特性,形成了十分复杂的细胞因子调节网络,参与人体多种重要的生理功能。
    细胞因子ELISA试剂盒适用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎(HEV)病毒 IgM 抗体ELISA检测。一般有五种检验方法:间接法、捕获法、竞争法、直接法和夹心法,本文选择直接法重点讲一下。
    直接法是用样本中的游离抗体/抗原与固相的酶标抗体/抗原竞争性结合的分析方法。当游离抗体(或抗原)浓度越高,则能与固定抗原(或抗体)结合的酶标抗体(或抗原)就越少,后续显色就越浅,即与对照相比,显色越浅,表示检测样本中抗体(或抗原)含量越高。该法特别适合小分子物质的检测也可用于检测比较不纯的样本,且重复性好,但是检测的灵敏度和专一性较差。竞争法测抗原常用于检测小分子抗原及半抗原,这类抗原通常缺乏两个以上的识别位点,不适用于双抗夹心法进行测定。该方法在商业化ELISA试剂盒中被广泛运用。竞争法测抗体常常用于检测某些干扰物质不易去除的样本及难以纯化得到抗原等情况。下图以固相酶标抗原为例,固相酶标抗体类似

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