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组织蛋白酶K试剂盒在骨质疏松发挥的作用
2015-03-12 浏览次数：1474
一.组织蛋白酶K试剂盒简介：
定量测定人血清或细胞培养上清液中由破骨细胞分泌出的组织蛋白酶K。组织蛋白酶K降解骨胶原基质，是zui丰富的活化和吸收破骨细胞的合成蛋白，也是吸收活性的特异性标志物。蛋白酶K在组织溶解、重建和骨胶原降解中具有重要作用。组织蛋白酶K在不同物种间的高同源性(小鼠86%，大鼠88%，猪97%，兔96%)，因此试剂盒也能用于动物模型的研究。
二.组织蛋白酶K试剂盒临床应用：
- 骨转换研究
- 恶性骨疾病
- 应用于肿瘤学
- 监测骨吸收药物的疗效
- 预防糖皮质激素诱导的骨质疏松
- 预防原发性和继发性骨质疏松
- 监测作用于骨骼多个区域的炎症疾病
- 监控治疗如激素替代治疗，双膦酸盐治疗
- 监测风湿性骨关节炎和骨关节炎的治疗疗效
- 蛋白酶k与骨关节炎软骨退变关系密切，特别在早期发病中有重要作用
三.组织蛋白酶K试剂盒样本制备：
1. 病人在平卧安静状态下进行静脉取血。采血量一般为2-3 ml。
2. 分析标本可以是血清，或是细胞培养清液。
3. 室温下，90分钟内离心分离并分析标本。建议的离心分离条件是：4°C下2000转离心15分钟。
4. 在4°C标本可以保存2天。
5. 若长时间保存标本，可在-20°C 下或在-70°C的条件下存放。zui多进行4次解冻。
血脂标本或溶血标本会引起结果错误，因此，分析之前必须充分混合标本。
四.组织蛋白酶K试剂盒操作步骤：
1 冲洗缓冲液（WASHBUF）：
1. 稀释浓缩洗液，稀释比例为1：20，即 50 ml 洗液中加入 950 ml 蒸馏水。
2. 浓缩液中的晶体可在室温下溶解。
3. 冲洗缓冲液在2°C - 8°C条件下稳定，4. 在标5. 注的有效期限内都可使用。
6. 分析时只能使用稀释后的洗液缓冲液。
3 标准液（STD）：
1. 在每个瓶中加入1ml的ASYBUF分析缓冲液；
2. 在室温下（18-26°C）放置20分钟；
3. 在VORTEX MIXER上充分混匀；
4. 标准液若要分几次使用，建议分装保存，避免冷冻－解冻过程；5. 配制好的标准液在-20°C下稳定，可在有效期内使用；
6. 一定不要将标准液在室温下放置
4 质控液（CTRL）：
5 在每个瓶中加入1ml的ASYBUF分析缓冲液；
6 在室温下（18-26°C）放置20分钟；
7 在VORTEX MIXER上充分混匀；
8 质控液若要分几次使用，建议分装保存，避免冷冻－解冻过程；
9 配制好的质控液在-20°C下稳定，可在有效期内使用；
10 一定不要将质控液在室温下放置。
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