技术文章 / article
小鼠VEGF ELISA试剂盒说明书
2016-02-19 浏览次数：1618
一. 小鼠VEGF ELISA试剂盒背景介绍：
血管内皮生长因子 (VEGF) 是生长因子的亚家族，具体来说，属于胱氨酸结生长因子中的血小板衍生生长因子 (PDGF) 家族。它们是重要的信号转导蛋白，参与血管发生 (胚胎循环系统从形成) 和血管生成 (从已存在的脉管系统生长形成血管)。VEGF可刺激血管发生和血管生成。当血液循环不足时，可参与回复组织供氧系统。VEGFzui主要的作用是血管生成。在胚胎形成期，VEGF调控内皮细胞的增殖、迁移和存活，从而调控血管密度和大小，但无法决定血管的类型。在支气管哮喘和糖尿病患者的血清中含有高浓度 VEGF。当 VEGF过表达时会引起疾病。供血不足时，实体肿瘤的大小受限；而表达 VEGF的肿瘤则会不断生长并发生转移。VEGF过表达会导致眼睛视网膜和身体其他部分的血管性疾病。贝伐珠单抗和雷珠单抗可抑制 VEGF，并控制或减缓疾病进程。
二. 小鼠VEGF ELISA试剂盒检验原理：
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗小鼠 VEGF单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、待测样本和生物素化的检测抗体，经过孵育，样本中存在的 VEGF与固相抗体和检测抗体结合。洗涤去除未结合的物质后，加入辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素(streptavidin-HRP)。洗涤后，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中 VEGF的浓度成正比。加入终止液终止反应，在 450 nm波长(参考波长 570 - 630 nm)测定吸光度值。
三.小鼠VEGF ELISA试剂盒标本收集：
1.细胞培养上清
300 g离心 10分钟去除沉淀物，即刻检测, 或者分装，-20℃以下贮存。
2.血清标本
分离管分离血清。在 1000 g离心之前，使血样凝集 30分钟。吸取血清样本之后即刻检测，或
者分装，-20℃以下贮存。
3.血浆样本
EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。1000 g离心 3 0分钟收集样本。即刻检测，或者
分装，-20℃以下贮存。
本试剂盒可能适用于其它生物学样本。细胞培养上清、血清和血浆已经过验证。
注意：检测前，样本中可见的沉淀必须去除。不要使用严重溶血或高血脂的样本。
样本应分装并贮存于-20℃，以避免小鼠 VEGF活性的丢失。如果在 24小时内检测，样本可
以存放在 2 - 8℃。
避免样本的反复冻融。在检测前，冷冻样本应该缓慢地恢复至室温，轻柔地混匀。
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