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颗粒体蛋白GRN试剂盒说明书
2016-03-01 浏览次数:1922
一.颗粒体蛋白GRN试剂盒背景介绍:
颗粒体蛋白(GRN)在人类中由 GRN 基因编码。它的前体蛋白 — 颗粒蛋白前体,又名畸胎瘤细胞源性生长因子。信号肽被剪切后可产生成熟的 GRN,进一步剪切可产生许多分子量为 6 kDa的活性多肽。肽和完整的 GRN 都可调节细胞生长。然而,GRN 蛋白家族的不同成员可能对细胞生长产生抑制和/或促进作用。GRN 家族成员对正常发育、伤口愈合和肿瘤发生有重要作用。GRN可能有细胞因子样活性,可在炎症、创伤修复和组织重塑中发挥作用。
人肝吸虫可分泌类似 GRN 的生长激素,从而导致胆管癌的发展。GRN 基因突变可通过高外显率的常染色体显性遗传,产生zui高达 25%的额颞叶变性。
二. 颗粒体蛋白GRN试剂盒检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测技术。特异性抗人 GRN 单克隆抗体预包被在高亲和力的酶标板上。酶标板孔中加入标准品、检测样本和辣根过氧化物酶标记的检测抗体,经过孵育,样本中存在的 GRN 与固相抗体和检测抗体结合。洗涤后,加入显色底物 TMB,避光显色。颜色反应的深浅与样本中 GRN 的浓度成正比。加入终止液终止反应,在 450 nm 波长(参考波长 570 - 630 nm)测定吸光度值。
三.颗粒体蛋白GRN试剂盒样本采集与贮存
1.细胞培养上清
300 g 离心 10 分钟去除沉淀物,即刻检测, 或者分装,-20℃以下贮存。
2.血清样本
分离管分离血清。在 1000 g 离心之前,使血样凝集 30 分钟。吸取血清样本之后即刻检测,或
者分装,-20℃以下贮存。
3.血浆样本
EDTA、枸橼酸钠或肝素抗凝收集血浆样本。1000 g 离心 3 0 分钟收集样本。即刻检测,或者
分装,-20℃以下贮存。
本试剂盒可能适用于其它生物学样本。细胞培养上清、血清和血浆已经过验证。
注意:检测前,样本中可见的沉淀必须去除。不要使用严重溶血或高血脂的样本。 样本应分装并贮存于-20℃,以避免人 GRN 活性的丢失。如果在 24 小时内检测,样本可以存放在 2 - 8℃。
避免样本的反复冻融。在检测前,冷冻样本应该缓慢地恢复至室温,轻柔地混匀。
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