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讲述FGF-23试剂盒的测试流程
2019-01-22 浏览次数：1874
FGF-23试剂盒用于测定血清，血浆及相关液体等样本，例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
FGF-23试剂盒的测试流程如下：
1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2、酶标板置4℃，包被过夜。
3、洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4、阴性对照孔每孔加入pbs 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6、洗板，同4。
7、每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9、洗板，同4。
10、每孔加tmb显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11、每孔加100μl 2mol/l h2so4终止反应。
12、分别测450nm 吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13、数据处理：在得出标本s和阴性对照n的 od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
注意用于FGF-23测试的标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融。
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