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粪便钙卫蛋白试剂盒如何检测双抗体呢？
2020-08-14 浏览次数：1199
粪便钙卫蛋白是诊断肠炎疾病严重性的一个指标，肠炎性疾病（IBD）患者的粪便钙卫蛋白浓度高，其疾病复发的风险增大。低粪便钙卫蛋白浓度与肠的同种异体移植排斥的低风险相关。该检测使用特异性单克隆抗体，确保测试只检测到钙卫蛋白。因此粪便钙卫蛋白试剂盒是比不可少的。
粪便钙卫蛋白试剂盒用于检测双抗体步骤:
(1) 包被：用0.05M PH9.牰碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1～10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml，4℃过夜。次日，CALPRO试剂盒，粪便钙卫蛋白试剂盒弃去孔内溶液，用洗涤缓冲液洗3次，每次3分钟。(简称洗涤，下同)。
(2) 加样：CALPRO试剂盒，粪便钙卫蛋白试剂盒加一定稀释的待检样品0.1ml于上述已包被之反应孔中，置37℃孵育1小时。然后洗涤。(同时做空白孔，阴性对照孔及阳性对照孔)。
(3) 加酶标抗体：于各反应孔中，加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小时，洗涤。
(4) 加底物液显色：于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分钟。
(5) 终止反应：于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml。
(6) 结果判定：可于白色背景上，直接用肉眼观察结果：反应孔内颜色越深，阳性程度越强，阴性反应为无色或极浅，依据所呈颜色的深浅，以“+”、“-”号表示。也可测O?D值：在ELISA检测仪上，于450nm(若以ABTS显色，则410nm)处，CALPRO试剂盒，粪便钙卫蛋白试剂盒以空白对照孔调零后测各孔O?D值，若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍，即为阳性。
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