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还没了解IGF-1试剂盒的看这里!

2020-12-16 浏览次数:1231

    IGF-1试剂盒是一种固相的酶联免疫实验,采用争竞法的原理。实验开始前将病人样品、标准品和质控品先酸化和中和好。包被板的微孔中包被了单克隆抗体,这种单克隆抗体对IGF-1分子上的某单一抗原位点具有特异性。将预先处理好的样品与酶联物(生物素标记的IGF-1)在室温下温育。之后洗板,再加入酶复合物(辣根过氧酶标记的链亲和素)并温育。加入底物溶液后,溶液所显示的颜色强度与病人样品中IGF-1的浓度成反比。
  IGF-1试剂盒种属有人、大鼠、小鼠、猴、兔、猪、马、鱼、鸡、鸭、羊等等;样本包括血清、血浆、尿液、细胞培养上清、组织标本等。如何处理IGF-1试剂盒的样本:
  1、血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
  2、血浆:应根据试剂盒的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,加入10%(v/v)抗凝剂(0.1M柠檬酸钠或1%heparin或2.0%EDTA.Na2)混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。如有沉淀形成,应再次离心。
  3、尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。
  4、细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
  5、组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。

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