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FGF-23试剂盒的测试步骤是这样子吗？
2021-11-26 浏览次数：967
FGF-23试剂盒是近来发现的相关蛋白大家族中的新成员。其基因编码一个含250个氨基酸残基的蛋白。FGF-23的氨基末端（aa1-24）是疏水的且很可能作为其进入血液循环的信号肽。它的羧基末端（aa180-251）与FGF蛋白家族的其它成员仅有有限的氨基酸同源性。
测定人体血液中的FGF-23水平可以为不同程度的低磷血症和高磷血症患者的实验室评估提供重要的诊断工具。此外，对FGF-23的灵敏测定可以为骨骼调节和矿化动态提供新的见解。用于测定血清，血浆及相关液体等样本，例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。
FGF-23试剂盒的测试步骤：
1、待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。
2、酶标板置4℃，包被过夜。
3、洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍将洗涤液注满板孔后，即甩去，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
4、阴性对照孔每孔加入pbs50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人aif抗体工作液50μl。
5、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
6、洗板，同4。
7、每孔加1:5000稀释的hrp-标记的山羊抗兔抗体工作液100μl。
8、酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。
9、洗板，同4。
10、每孔加tmb显色液100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。
11、每孔加100μl2mol/lh2so4终止反应。
12、分别测450nm吸光值w1和630nm吸光值w2，终测得的od值为两者之差w1-w2，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
13、数据处理：在得出标本s和阴性对照n的od值后，计算s/n值。s/n≥2.1为阳性判定标准。
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