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细胞因子试剂盒在科研方面的应用
2022-02-20 浏览次数：1011
细胞因子试剂盒从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。灵敏度有二层含义，为试剂检出被检物质的低量的能力；为试剂对大量样品中阳性检出的能力。特异性常用交叉反应率表示。含有与待测物相近结构部份的物质可能存在交叉反应，使测定结果升高，可能导致假阳性，所以交叉反应是评价其质量的关键指标。精密度一般指其批内CV%，其值应小于15%；定量试剂应同时考察线性范围。准确度：通过添加回收实验进行评价。
细胞因子试剂盒主要用于科研方面，不用于临床诊断，可以用于检测各种指标。做快速检测时，待检测的样品数越多，出现加错的概率也就越大，特别容易出错的是在酶联偶合物（conjugate）与样品液或标液混合的阶段，因为这时使用的是单道枪。其实解决的方法比较简单，我们只要把操作上的顺序加以调换，即先把待测液或标液加入稀释孔中，再加入酶联偶合物就不会出现错误了。而且这两个顺序交还对结果也没有影响，因为这一步的主要目的是让两种液体充分混合。
细胞因子试剂盒采用双抗体夹心ELISA法，用抗肝细胞生长因子(HGF)抗体包被于酶标板上，实验时样品或标准品中的人肝细胞生长因子(HGF)与包被抗体结合，游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗肝细胞生长因子(HGF)抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗肝细胞生长因子(HGF)抗体与结合在包被抗体上的人肝细胞生长因子(HGF)结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物，游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB)，TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色，加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值，肝细胞生长因子(HGF)浓度与OD450值之间呈正比，通过绘制标准曲线计算出样品中细胞生长因子(HGF)的浓度。
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